生物實驗報告范例(15篇)
在人們越來越注重自身素養的今天,報告與我們愈發關系密切,我們在寫報告的時候要注意涵蓋報告的基本要素。那么報告應該怎么寫才合適呢?下面是小編為大家收集的生物實驗報告,希望對大家有所幫助。
生物實驗報告1
一、實驗目的
1.初步學會探索酶催化特定化學反應的'方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應。
二、實驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與斐林試劑發生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網、酒精燈、燒杯、質量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實驗過程
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五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
。.兩支試管保溫時,為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?
3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實驗報告2
一、實驗原理
當外界溶液濃度大于細胞液濃度時,根據擴散作用原理,水分子會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質層伸縮性較大,從而使二者分開;反之,外界溶液濃度小于細胞液濃度,則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質和壁又復原。
二、目的要求
1.初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法;
2.理解植物細胞發生質壁分離和復原的原理。
三、重點難點(實驗報告不寫這一點,可適當調整添加在“注意”這一部分)
1.初步掌握植物細胞質壁分離和復原的實驗方法;
2.臨時裝片的制作;
3.低倍顯微鏡的使用。實驗器材:紫色洋蔥的鱗片葉、刀子、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙(濾紙代替,濾紙可分為剪開幾條)、顯微鏡;
四、方法步驟
臨時裝片制作:
1選材:選用紫色特別深的洋蔥外表皮;說明:在實驗之前,最好將洋蔥放在水中浸泡一下,可以使洋蔥吸水多一些,而且代謝也比較旺盛,實驗效果明顯。
2:將洋蔥的外層剝去兩層(因為處于最外的可能已經死亡)。取表皮:在洋蔥的外表皮上,用刀片劃“井”字,用鑷子輕輕撕取一小塊;(關鍵:最好撕取單層細胞,如果撕的太厚,則會使細胞重疊,嚴重影響實驗效果;)
3制片:在載玻片中央滴上一滴純凈水,然后將取下的洋蔥表皮放在水中,輕輕展開。確保洋蔥表皮平整無卷曲,并且水中不能有氣泡。接著,將蓋玻片以45°角慢慢放置在載玻片上,確保清水充滿載玻片和蓋玻片之間的空間,使其擠出所有空氣。
4蓋玻片一端滴入糖水,于另一端用吸收紙重復幾次吸引(可重復幾次滴糖水和吸引的過程)。
質壁分離實驗后可接著進行質壁復原
質壁復原實驗
處理
取下臨時裝片,在一側滴入清水,另一側再用吸水紙重復幾次吸引,以確保洋蔥表皮細胞完全浸在幾乎是清水中;(注:無吸水紙可先用濾紙代替)
觀察
在低倍鏡下觀察到一個細胞,發現了一個明顯的質壁分離現象。細胞中央的液泡逐漸變大,顏色也變淺,最終細胞質和細胞壁再次緊密結合在一起。如果質壁分離沒有復原,那就說明外部溶液的'濃度過高,導致了細胞的死亡。根據以上觀察,得出以下總結:當細胞內液體的濃度小于外部溶液的濃度時,由于滲透作用,細胞會失去水分而發生質壁分離現象;而當細胞內液體的濃度大于外部溶液的濃度時,細胞則通過滲透作用吸收水分,并發生質壁分離的復原現象。
分離實驗特例
如果外界溶液包括葡萄糖、硝酸鉀、氯化鈉、尿素和乙二醇等物質,當細胞進行質壁分離后,由于細胞主動或被動地吸收了溶質微粒,導致細胞液濃度增加。這時,植物細胞會通過吸水使質壁分離部分自動復原。
注:質壁分離與復原結構示意圖
生物實驗報告3
本學期第一次月考已經結束,現將考試情況做如下分析:
一、基本情況:
本次月考試卷共有四個大題,考試內容為第五單元第一、二章和第三章,最高分分,最低分分,平均分,及格率,優秀率。此次考試包括選擇題、連線題、識圖題和實驗探究題。題型難易適當,符合新課程考核要求,且試題涉及的內容廣泛,有課本內的,也涉及到課本外的知識。主要考查學生的觀察能力、分析能力、綜合能力及語言表達能力。
二、試卷結構及試題賦分。
1、試卷的試題難易比為7:2:12、基礎知識和基礎技能考題內容占75%左右。
3、試卷結構較合理,難度適中,既考核學生對生物基礎知識和基本技能的掌握,同時也考查評價了學生的情感、態度、價值觀及學生的綜合應用能力,符合八年級學生的認知規律和能力梯度。
三、根據閱卷及考生成績情況分析:
第一大題單選題15分:考察基本概念和知識技能及學生身邊生活經驗知識,失分主要在1、3、7、9、11等小題上。第二大題連線題10分,學生失分率較低,失分主要集中在2小題上,對于先天性行為和學習行為概念掌握不夠清晰。第三大題識圖題17分,失分較多的為第2題主要是學生對課本基礎知識掌握不牢,把生物知識應用到生活經驗上的能力較差。第四大題為實驗探究,在此次考試本題作為送分題,題目比較簡單,從本次考試結果來看,本題得分率在90%以上,達到了預期的目的。
四、對今后教學的反思。
1、教師要在平時多用教法激發學生學習生物的興趣,要重視“雙基知識”,即基礎知識和基本技能還要加強。
2、教師在教學中多和學生交流合作,把書本知識和生活經驗多聯系,要重視培養學生收集資料歸納分析能力,訓練語言表達能力。
3、教師注要重課本基礎知識點的教學,做好識圖填空題型。注重培養學生的實驗探究能力和應用知識的能力。
4、學生的錯別字較多,教師要加強文字的書寫,尤其是一些概念或名稱中不經常使用的文字的書寫。
5、教師在生物教學中要多重視過程教學及實驗教學,把平時的形成性評價做到實處,分組實驗及實驗習題要做認真,實驗報告都要認真填寫。養成學生觀察事物的.習性及分析歸納能力,培養創新思維的能力,使教學水平更上一層樓。
八年級生物實驗教學計劃
新的學期開始了,新學期有新的打算。對于我來說,這學期將是一個關鍵而忙碌的學期。
之所以說是一個關鍵而忙碌的學期,是因為我區八年級生物、地理要參加中考,我們不但要學習八年級下冊的知識,還要對四冊書進行全面系統的復習,這學期時間又短,所以我們面臨很大的挑戰。除了做好自己的本職工作外,還要利用一切可利用的時間進行學習,提高自己的業務能力。為了更好的利用時間,合理的安排教與學的進度,現對本學期做如下計劃。
一、調整教學思路,提高學生成績;。
關于生物、地理等科目,學校一貫不夠重視,而這學期則不同,每周安排三課時來教學,可見任務之重,所以應把提高學生的成績放在教學的首位。如果生物地理考不好,會影響到他們升初三后學習的動力。所以無論如何應盡自己的最大努力,督促每一個同學,不管結果怎樣,都要努力拼搏三個多月。但我認為要提高教學成績,最關鍵的是要調動學生學習的熱情,全身心的投入到學習中。正所謂:“知識是學會的,不是教會的!彼栽趶土曔^程中,老師盡量少講或不講,讓學生充分的進行小組之間的合作、討論和學習。生物課的復習一般都是分為幾部分內容:
(1)知識點的歸納,這個可以讓學生課下整理;。
(2)知識點的分析,這個可讓學生分析,老師補充;。
生物實驗報告4
實驗一:練習使用顯微鏡
目的要求:
1.練習使用顯微鏡,學會規范的操作方法。
2.能夠獨立操作顯微鏡。
3.能夠將標本移動到視野中央,并看到清晰的圖象。
材料用具:顯微鏡,寫有“上”字的玻片,動、植物玻片標本,擦鏡紙,紗布。
方法步驟
1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實驗臺距邊緣7厘米左右處,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3.動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔。
4.把一個較大的光圈對準通光孔。一只眼注視目鏡內,另一只眼睜開。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀察的玻片標本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6.轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止此時眼睛一定要看著物鏡)。
7.一只眼向目鏡內看,同時逆時針方向轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉動細準焦螺旋,使看到的物象更加清晰。
8.練習將所觀察的標本移到視野中央,先移動一下標本,物象朝相反的方向移動。說明了在目鏡中看到的像是真實的像的倒像。
注意事項
實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡,請用擦鏡紙。轉動轉換器,把兩個物鏡偏到兩旁,并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進鏡箱里,送回原處。
討 論
1.顯微鏡的使用步驟有哪些?
答:1、取鏡和安放2、對光3、觀察(放片、調焦) 4、清潔與收鏡
2.使用顯微鏡觀察時,為什么在下降鏡筒時眼睛要注視物鏡?
答:物鏡把載玻片壓碎,也容易劃傷物鏡。
3.在顯微鏡下能看清寫在不透明紙上的“上”字嗎?
答:看不到,不透明的紙會阻擋光線從物鏡進入光筒再從目鏡射出,所以可能什么也看不見。
實驗時間:20xx.9.15
實驗二:觀察植物細胞
實驗目的:
1、制作植物細胞的臨時裝片,學習制作臨時裝片的基本辦法.
2、認識植物細胞等基本結構. 3、練習畫細胞結構圖.
實驗準備:
分組實驗器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實驗過程:
一、制作洋蔥表皮玻片標本
1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。
2、把載玻片放在實驗臺上,用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。
制作臨時裝片
3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內側撕取一小塊透明在膜——內表皮。把撕下的內表皮浸入載玻片的水滴中,用鑷子把它展平。
4、用鑷子夾起蓋玻片,是它的一邊先解除4載玻片上的水滴,然后緩緩地放下,蓋在要觀察的材料上,這樣才能避免蓋玻片下面出現氣泡而影響觀察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側。
6、用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引,使染液浸潤標本的全部。
三、觀察洋蔥表皮細胞
利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞,先用低倍鏡下觀察,再在高倍鏡下觀察。
四、洋蔥鱗片葉表皮細胞圖。
五、實驗結束。
回收實驗器材,整理實驗桌。
實驗時間: 20xx.9.22
實驗三:觀察人體口腔上皮細胞
目的要求:
1. 制作和觀察人體口腔上皮細胞的臨時裝片
2. 認識人體口腔上皮細胞的結構
3. 熟練畫細胞結構圖
材料用具:
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟
(一) 制作人口腔上皮細胞的臨時裝片
1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片(很薄,應輕擦)
2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水(0.9%),說明:為什么用0.9%的生理鹽水,觀
察洋蔥表皮裝片用清水,都是為了讓細胞所處的環境和它們所生活的環境相同,
不至于脹破或變形,使細胞保持原狀。
3. 漱凈口。目的:將口腔的飯粒清除,以保證所取的細胞純度。
4. 用牙簽在口腔內壁輕劃幾下,將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中,盡量涂均勻。
5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片,使它的一側先接觸載玻片的水滴,然后慢慢放
平(注意:避免產生氣泡)。
6. 染色。①在蓋玻片一側滴加稀碘液,②用吸水紙在蓋玻片另一側吸引,使染液
浸潤標本的全部。
(二) 用顯微鏡觀察。
使用顯微鏡①安放②對光③放置玻片標本,調節焦距,用眼觀察,在視野中會看到被染成桔黃色的上皮細胞.
。ㄈ├L圖:
人體口腔上皮細胞模式圖
。ㄋ模┱恚呵鍧嵅F,廢物放在指定位置。
歸納討論:人的口腔上皮細胞有哪些基本結構,植物細胞和動物細胞相同和不同之處。 答:人的口腔上皮細胞的基本結構有細胞膜、細胞質和細胞核;植物細胞與動物細胞相比,細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。
實驗時間: 20xx.9.27
實驗四:觀察人體的基本組織
目的`要求:
1.觀察人體基本組織的永久切片,認識人體的四種基本組織;
2.描述同一種組織中細胞的共同特點;
3.描述不同組織中細胞形態上的不同之處;
4.根據觀察,概述組織的共同特點,形成組織的概念。
材料器具:
顯微鏡;扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片;橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片;骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結締組織玻片;神經組織的玻片。
方法步驟:
1.根據教師提供的玻片,逐個在顯微鏡低倍鏡下認真觀察,注意細胞的形態特征和細胞間的聯系特點。
2.根據觀察,同組間的同學互相討論,認真填寫下表。
主要分布位組織類型 主要特征 功能 舉例 置
皮膚,消化 皮膚,小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護,分泌 道 上皮
四肢,軀 骨骼肌,平滑肌肉組織 呈長條狀緊密排列 干,內臟器 收縮,舒張 肌 官
支持,連接, 軟骨,軟組結締組織 細胞之間間隙較大 全身各處 保護,營養 織,血液
產生傳導興神經組織 形狀獨特呈發散狀 神經系統 神經纖維 奮
實驗時間:20xx.10.26
實驗五:觀察葉片結構
目的要求:
1,練習徒手切片.
2認識葉片的結構.
3畫葉片的表皮細胞和保衛細胞圖.
材料用具:
新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.
方法步驟:
一,練習徒手切片,制作葉片橫切片的臨時切片
1,把新鮮的葉片平放在小木板上.
2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割.
3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次,刀片要咱蘸一下稅)。把切下的薄片放入水中。
4,用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時切片。
二,觀察葉片的結構
1用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片,再觀察葉片的永久橫切片。
2在顯微鏡下分清業的表皮,葉肉和葉脈。
三,觀察葉片的下表皮
1用鑷子撕下一小塊葉片(如蠶豆葉片的下表皮,制成臨時裝片。
2 用顯微鏡進行觀察,看一看葉片下表皮的細胞是什么樣子的,下表皮上有沒有氣孔?下表皮氣孔多于上表皮。
四,實驗結果。
討論:保衛細胞和它周圍的細胞在結構上有什么不同?保衛細胞的這種結構特點對蒸騰作用有什么意義?
答:當水分充足時,保衛細胞膨脹張開,則氣孔張開,這時,蒸騰作用很強;當水分不充足時,保衛細胞收縮關閉,則氣孔關閉,這時,蒸騰作用變弱。保衛細胞能夠控制氣孔開關,所以也就能起到促進或減緩蒸騰作用的意義。
實驗時間:20xx.12.5
生物實驗報告5
質粒DNA的提取、純化及檢測
姓名:XXX學號:2011001400XX年級:20xx級生物基地班 實驗日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒DNA的原理和方法。
2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。
3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實驗原理】
1、質粒DNA的制備方法
質粒(Plasmid)是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環狀雙鏈DNA分子,分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中,但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1~200Kb之間,是應用最多的質粒類群,在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的DNA。
質粒DNA的制備包括3個步驟:①培養細菌,使質粒DNA大量擴增;②收集和裂解細菌;③分離和純化質粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒DNA。
2、質粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中,染色體DNA和質粒DNA均被釋放出來,但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性;共價閉合環狀質粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調節堿性溶液至中性時,變性的質粒DNA可恢復原來的共價閉合環狀超螺旋結構而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復性,而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心,與復性的溶于溶液的質粒DNA分離。溶于上清液的質粒DNA,可用無水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質類似,乙醇沉淀
DNA的同時,也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質粒DNA。
3、凝膠電泳進行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質,它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中,其中的電離子會發生移動,移動的速度可因電離子的大小形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異,就可以區別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學的核心技術之一。
凝膠電泳技術操作簡單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發下也能直接檢測到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實驗。
分子生物學中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高,長度上相差1bp或質量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測定DNA的相對分子質量,分離經限制酶水解的DNA的片段,進一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負電荷,在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的'電泳遷移率主要取決于6個因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、【實驗材料】
1、實驗儀器
培養皿、接種環、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。
2、實驗試劑
LB培養基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預冷無水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對分子質量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實驗步驟】
1、準備實驗
配制LB液體培養基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養基;準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個 ,將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。
2、菌體培養
在含有Ap的LB平板上挑取一環攜帶有質粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養基中進行37℃振蕩過夜培養,培養基中加Ap100ul
。100ug/ml),質粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質粒得以生長。 過夜培養后菌體量大,雜質較多,然后用移液槍吸取過夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中,培養基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養4—6h至對數生長期后期,生長速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質少,適合提取質粒。
3、質粒提取
。1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒滿,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細胞。
。2)向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質量為106mg。
。3)洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細胞提前破裂,防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當的pH。
。4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對應),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發生了從bilayer(雙層膜)結構向micelle(微囊)結構的相變化導致細胞溶解。同時,強堿性使染色體DNA、質粒DNA和蛋白質變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
。5)按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ對應),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質粒DNA復性。反應形成的高鹽環境進一步加速了沉淀。
。6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側,用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
。8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色,隨著水分的減少質粒變為無色。所以為了完全溶解質粒,要在離心管上標記質粒所在位置。
。9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩定的生理狀態,呈弱堿性,有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質粒純化
。1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
。2)將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無色,在中間產生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質。
。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑,但是苯酚留在質粒溶液中會影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現的泡沫,有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質的存在。
。4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
。5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
。6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
。8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質粒檢測
。1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
。2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
。3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍色)的移動。
。4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進EB溶液中進行染色,完全浸泡約5min。
。5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項】
。1)滴加溶液II時,要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動作要快,因為強堿在溶液中停留時間不能過長,否則會破壞質粒DNA。
。2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強堿使質粒復性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實驗報告6
一、實驗目的:
1、通過對原核和真核各種形態細胞的光學顯微鏡觀察,了解細胞的形態及其顯微結構;
2、學習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀認識。
二、實驗材料和儀器:
小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實驗步驟:
(一)細胞形態觀察
l、動物細胞的觀察
。1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態構造。
。2)雞血細胞涂片的觀察:觀察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態特點。
2、植物細胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細胞和葉肉細胞的`基本結構。
。ǘ┘毎拇笮『蜏y量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉動目鏡上透鏡進行調焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實驗結果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量:
五、作業與思考:
1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。
白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時,白細胞能穿過毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細胞形態見下圖。
2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態圖見下。
3、在不同放大倍數下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數越大,在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大,而更容易測量準確。
生物實驗報告7
一、實驗目的
1. 學會提取和分離葉綠體中色素的方法。
2. 比較、觀察葉綠體中四種色素:理解它們的特點及與光合作用的關系
二、實驗原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上,而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑
中。故要提取色素,要破壞細胞結構,破壞葉綠體膜,使基粒片層結構直接與有機溶劑接
觸,使色素溶解在有機溶劑中。
葉綠體中的色素有四種,不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同,
因而隨層析液的擴散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實驗過程(見書P54)
1.提取色素:
2.制備濾紙條:
3.色素分離,紙層析法。(不要讓濾液細線觸及層析液)
4.觀察:
層析后,取出濾紙,在通風處吹干。觀察濾紙條上出現色素帶的`數目、顏色、位置和寬窄。結果是:4條色素帶從上而下依次是:胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1.濾紙條上的濾液細線為什么不能接觸到層析液?
2.提取和分離葉綠體中色素的關鍵是什么?
生物實驗報告8
一、實驗目的
1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發生滲透作用的`原理。
二、實驗原理
當細胞液的濃度低于外界溶液的濃度時,水分會通過原生質層進入外界溶液中,導致細胞壁和原生質層發生收縮。因為原生質層的收縮性大于細胞壁,隨著細胞不斷失水,原生質層逐漸與細胞壁分離,即發生了質壁分離。相反,當細胞液的濃度高于外界溶液的濃度時,外界溶液中的水分會通過原生質層進入細胞液中,原生質層會逐漸恢復到原來的狀態,從而使植物細胞逐漸發生質壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實驗過程(見書P60)
五、討論
1. 如果把洋蔥表皮細胞浸泡在與細胞液等滲的蔗糖溶液中,這些細胞會發生質壁分離現象。
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發生質壁分離現象?為什么?
3.繪制一組模式圖,描述一個細胞在正常狀態下,經過處理后的變化。首先將細胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理,然后再經過清水處理。
生物實驗報告9
實驗日期: 年月 日
組長: 組員:
一、實驗要求
1、練習使用顯微鏡,學習規范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠將玻片標本移動到視野中央,并看到清晰的圖像。
二、實驗原理
三、材料用具
顯微鏡,寫有“上”字的玻片,動物、植物玻片標本,擦鏡紙,紗布。
四、方法與步驟
。ㄒ唬┤$R和安放
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實驗臺上,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
。ǘ⿲
3、轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的.前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
4、把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,便于以后同時畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡,以看到白亮的視野。
。ㄈ┯^察
5、把所要觀察的玻片標本(也可以用印有“e”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標本要正對通光孔的中心。
6、轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標本)。
7、左眼向目鏡內看,同時反方向轉動粗準焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項:
1、實驗完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器,把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進鏡箱里,
生物實驗報告10
一、課題的提出
創新時代賦予教育創新使命,綜合高考要求呼喚綜合創新能力培養。深化素質教育改革,加強綜合創新能力培養是對數干年的“應試+科舉”式的傳統教育模式的拼棄。盡管經過了現代化教育思想和理論的說孔,但仍存在部分教師教學觀念和方法比較陳舊,尤其是創新意識創新實踐在教學中使用缺乏足夠的認識。古今中外的教育家創立了不少有效的教學方法,為我們借鑒應用,提供了充分的條件。我們在運用教學方法時,做到內容與形式的統一,根據教材不同性質的內容和學生的實際情況,運用不同的教學方法,挖掘教材中創新的教育資源,加強創新教育研究,使教學方法具有靈活性、多樣性和創造性。
二、課題的實驗目標
1、明確實現高中生物課程目標:養成實事法語是的科學態度,養成勇于探索不斷創新的精神與合作精神。發展比較、判斷、推理、分析、綜合等思維能力,初步形成創造性思維品質和創新意識,能夠運用學到的生物學知識評價和解決某些實驗問題。2、確立高中生物綜合創新教育模式。
3、通過實驗研究,全組教師樹立正確的教育思想,加強學習,不斷進行知識創新,能力創新,勇于探索,能利用各種現代化教學手段和現有實驗條件進行綜合創新,教育研究,全面提高業務素質和教學效果。
三、實驗過程
、鍖嶒瀸ο
我們采用隨機抽樣方法,選取成績一般的兩個班作為實驗班級。
、鎸嶒瀮热荩
1、采用生動活潑,靈活多樣的教學手段和教學方法,引導學生自主學習,自主探索,誘發學生對生物學的'興趣和求異創新的思維火花,逐步形成一套適合高中生心理和思維特點的新的教學模式。
2、開展STS教育實驗。針對高考改革的要求,聯合社會發展,熱點問題及生產生活實際,讓學生了解關心社會發展與科技進步,激發創新欲望。用談話法、討論法、實驗法及分析兩部大開發,環境污染、疾病與健康等熱點問題,提高學生創造性地解決問題的能力。
3、高二生物課將研究性學習作為教材改革的主要內容之一。充分利用現有實驗器材與設備,校園中生物基地,培養學生合作學習、合作研究的精神,使學生得到實踐鍛煉的機會和直接的創新體驗,增強創新意識,培養創新情感,提高創新能力。
4、高三生物復習中主要是加強綜合問題的研究,注意知識的滲透融合,是實現知識綜合化、系統化、網絡化,培養綜合創新能力的有效手段。
、鐚嶒灧椒
本課題的研究采用以實驗研究為主的方法,輔之以經驗總結法、文獻法和調查分析法,同時注意了資料的積累與分析,總結出研究報告一份,成果有論文、總結及創新教育實便資料多件。
、鑼嶒灢襟E
1、準備階段:我們首先注意優化課堂教學結構,突出實驗創新內容的安排。確定試點班級與實驗教師,擬定實驗方案,形成初其數據資料。為實驗順利進行提供良好物質基礎。
2、實施階段:收集整理資料,加強理論學習,通過不同途徑指導學生創新實踐。
、艑嵤⿲嶒炞兞亢涂刂茻o關變量。其中自變量:科學合理地指導學生的創新實踐活動,固變量:提高學生學習興趣和操作技能,全面提高學生創造性地解決問題的創新思維和創新能力。教師、學生、教學條件既是實驗研究的自變量和固變量,也是影響實驗效果的相關變量,在實驗中,不斷排除不列于實驗研究開展和影響實驗信度的干擾因素,由教師在實驗班中施行實驗內容,作用于實驗對象。
、茰y試。在每節實驗課里,對課堂教學效果進行跟蹤測試。
、儆^察:由實驗教師對學生的課堂行為進行觀察記錄、統計。主要觀察學生對教學內容是否感興趣。
、跍y量:包括達標測試,課前安排好內容,操作熟練者為達標。
在實施階段,教師邊實驗、邊學習、邊研究、邊小結,每兩周舉行一節觀摩課,積累典型課例,豐富創新教育素材。
3、總結階段
按實驗方案進行總結、整理資料,統計分析數據,匯編成果目錄、積累成功實踐的素材,為進一步擴大實驗研究成果,更好地開展創新實踐做好物質準備。
四、實驗成果
、鍢嫿烁咧猩飳嶒灲虒W與研究性學習自學輔導模式:
在原有的課堂教學中,一貫是教師講,學生聽,實驗課上教師講,學生做。在課堂上學生始終處于被動地位,喪失了探索、求知的學習主動性。沒有做過的實驗學生就束手無策,研究性學習更是無從下手,不會設計。為此,我們提出在教學基礎知識訓練基本技能時注重啟發誘導學生自我探索,自行學習,最后形成新技能這一自學輔導模式。培養了學生自我學習的能力和對生物不斷探索的強烈欲望。
教學模式可根據具體研究的內容與主題,所采取的研究手段等構建。如“酸雨對植物的影”一課采用創設情景提出問題小組討論實地觀測數據分析反饋應用的模式;“植物對水分的吸收”一課采用確定目標提出假設實驗研究結果分析歸納總結的模式。構建教學模式必須注意以下幾個要素;
、賹W生主體性的體現要充分;
、诮處煹闹笇ё饔靡鞔_;
、蹖W生研究的層次要分明;
、芤欣谂囵B學生的創新精神和團隊合作精神。
探究式教學模式的一般操作框架如圖:
、婕ぐl了學生的求知欲望,提高了學生的探究能力實驗班學生通過一年多的探究實踐,對實驗與研究性學習內容有了強烈的興趣,教育生活化,生活課題化,學生從生活和社會實踐中尋找研究性學習的材料。如《校園植物資源調查》、《校園生態綠化方案設計》、《家用洗衣粉與河水污染》、《酸雨的危害調查》等。在施教過程中,綜合了各學科知識,利用校園網和校內外的現有資源培養學生的創新精神和實踐能力。不同學生對同一課題設計方案比較分析中,優化探究方法是開發學生思維空間的好辦法,探究活動中給予學生充分的活動空間和表現空間,為學生創新意識的激發及創新能力的培養提供必要的保障,為優化師生關系,實施創新教育落實素質教育,邁出堅實的步伐,在省生物學奧林匹克競賽中有2人獲省級獎,6人獲市級獎勵,高二生物實驗操作考試通過率100%,成績在同類學校中名列前茅。㈢教師的業務能力有了一定提高
通過實驗和總結,我們取得了一些開展研究性學習和指導學生探究實踐的經驗和方法,實驗教師提高了業務能力豐富了教育思想,我們的教研課多次受到了市縣教研室領導及兄弟學校同仁的好評。使我校生物教學邁上了一個新的臺階。已發表論文5篇,校級交流刊出多篇,在20xx~20xx學年度高三生物三次市統考中,我校生物均分在全縣完中分別列第二名、第二名、第一名。呈現穩步上升態勢。三位教師在市專業技能比賽中獲獎。
五、課題研究的成效與思考
1、利用現有校內外資源條件,結合教材中的有關內容,拓展學生思維空間,進行實驗探究活動,對學生個性的張揚具有獨特價值;對于培養學生探究意識和終身學習能力,為學生個性的發展提供廣闊的空間是切實可行的,也是行之有效的。
2、課題的研究主要是專題性研究,為我們采用開放式,滾動式管理模式開發校本課程,開展更富有創造性的探索,最大限度地發揮學生的主動性提供了可資借鑒的經驗。
3、受人力限制,教師課時多,對于學生個別輔導,全面提高方面還有一定的發展空間,有待于我們把研究成果進一步推向深入。
生物實驗報告11
一、實驗目的:
1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。
2、了解細胞凋亡的生物學意義
3、掌握凋亡細胞的形態學檢測方法
二、實驗原理:
1、細胞內的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯苯胺處理標本,細胞內的過氧化物酶能把聯苯胺氧化為藍色的聯苯胺藍,進而變為棕色產物,因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產物藍色聯苯胺是不穩定的,無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的`,基因控制的,一系列酶參與的過程。
3、凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實驗步驟:
細胞中過氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開,室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。
5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯苯胺混合液反應6分鐘(以蓋滿涂片為宜)
6、清水沖洗,番紅復染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)
細胞凋亡的形態學檢測與觀察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min
6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學顯微鏡下觀察。
吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)
2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min
4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結果與分析:
根據隨機選擇的幾個視野的統計,該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過程中核染色質的形態變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細胞凋亡的調控機制
細胞凋亡是一個受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動自殺過程,其觸發因素多種多樣,包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察(普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實驗報告12
一、實驗目的
1. 初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。
2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應。
二、實驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖,還原糖能夠與
斐林試劑發生氧化還原反應,生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可
以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網、酒精燈、燒杯、質量分數為2%的
新鮮淀粉酶溶液、質量分數為3%的'可溶性淀粉溶液、質量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實驗過程(見書P47)
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?
。玻畠芍г嚬鼙貢r,為什么要控制在60 ℃左右(低于50 ℃或高于75 ℃)?
3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?
生物實驗報告13
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布。
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴毎械募毎|處于不斷的流動狀態,觀察細胞質的流動,可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志!
步驟:制作蘚類葉片的臨時裝片;用顯微鏡觀察葉綠體;制作黑藻葉片臨時裝片;用顯微鏡觀察細胞質流動
3、材料:蘚類的葉,新鮮的.黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養皿,鉛筆
4、問題:細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動,為什么?葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系?植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態,這對于活細胞完成生命活動有什么意義?用鉛筆畫一個葉片細胞,標出葉綠體的大致流動方向。
生物實驗報告14
一、實驗目的
了解高架十字迷宮實驗的原理以及意義,掌握高架十字迷宮實驗的操作方法
二、實驗原理
高架十字迷宮(High plus maze)是利用動物對新異環境的探究特性和對高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動物的焦慮狀態。高架十字迷宮具有一對開臂和一對閉臂,嚙齒類動物由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動,但出于好奇心和探究性又會在開臂中活動,在面對新奇刺激時,動物同時產生探究的沖動與恐懼,這就造成了探究與回避的沖突行為,從而產生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進入開臂的次數與時間,十字迷宮距離地面較高,相當于人站在峭壁上,使實驗對象產生恐懼和不安心理。高架十字迷宮被廣泛應用于新藥開發/篩選/評價、藥理學、毒理學、預防醫學、神經生物學、動物心理學及行為生物學等多個學科的科學-研究和計算機輔助教學等領域,是開展行為學研究尤其是焦慮抑郁研究的經典實驗。
三、實驗動物與器材
昆明種小鼠(18-22g),高架十字迷宮(廣州飛迪生物科技有限公司),數據線,電源,電腦
四、實驗操作
1.雙擊左鍵“動物行為學分析系統”
2.進入系統之后,點擊“高架十字迷宮實驗視頻分析系統”
3.點擊自己的實驗賬號進入系統,在這里選擇root賬號,默認密碼為空
4.在左側邊欄右擊“我的實驗”,然后在打開的實驗信息欄中填寫所需信息,例如輸入實驗名稱“高架”
5.填寫完畢后,在左側側邊欄單擊“我的實驗”樹狀欄打開剛才建立的實驗名稱“高架”,右擊實驗名稱,單擊“添加動物”,然后填寫動物的相關信息,例如動物名稱“1”,分組為1。
6.點擊分組“1”,在菜單欄上選擇最后一個圖標“系統設置”,再點擊“視頻”出現如下顯示框:
7.右擊以上實驗框中左邊欄中的“高架”,可以顯示出“添加實驗箱”,輸入實驗箱信息,例如名稱為“1”
8.點擊按鈕“設置當前圖像為背景”;
9.接著再次點擊“高架”樹樁目錄可以看到開始設置的實驗箱“1”,點擊進入,下層目錄會出現五個分支“開臂1”“開臂2”“閉臂1”“閉臂2”“中央區域”
10.選定“活動區”,就可以選定菜單欄上面各種工具劃定活動區區域大小,如下圖所示:
11.選擇合適的識別算法和動物顏色,根據動物在畫面中的大小調節動物大小,以及根據識別情況調節靈敏度,根據實際測量設置活動箱的高度和寬度,如下圖所示:
12.然后就可以點擊“保存”按鈕保存設置,開始實驗錄像的錄制
13.點擊主菜單欄第一個按鈕開始錄制,出現如下顯示框:
在顯示框中選定待錄像動物和錄像時間等信息,然后點擊“開始錄像”,記錄5分鐘內的活動情況,錄制完成后點擊“退出”后直接退出。
14.點擊主菜單欄第三個按鈕“分析數據”分析剛才錄制的'錄像,出現如下顯示框:
15.設置開始和結束時間的區間范圍可以得出不同時間段的實驗結果,如果想導出excel的結果表單,可以點擊上方“導出結果”導出數據文件,錄像文件默認存儲在程序文件夾里的“Record”文件夾里
16.也可以在右側動物欄中最左側右擊,選擇錄像分析,查看軌跡等功能,對數據進行進一步分析。
五、實驗結果及討論
將測試小鼠編號為M1~M6,分別對其進行測試得到實驗結果如下表1.
表1高架十字迷宮結果記錄表
小鼠編號M1 M2 M3 M4 M5 M6
總時間(s) 220 220 220 220 220 300
進臂總次數8 10 10 9 9 10
中央進入次數7 10 11 9 9 11
進臂總時間(s) 181.27 151.93 98.67 77.73 154.27 129.55
中央滯留時間(s) 38.73 68.07 121.33 142.27 65.73 170.45
開臂滯留時間(s) 0 0 0 44 0.2 55
閉臂滯留時間(s) 181.27 151.93 98.67 33.73 154.07 74.55
開臂進入次數0 0 0 5 1 3
閉臂進入次數
8 10 10 4 8 7
開臂滯留時間百分比(%) 0 0 0 20 0.09 18.33
閉臂滯留時間百分比(%) 82.39 69.06 44.85 15.33 70.03 24.85
開臂進入次數百分比(%) 0 0 0 27.78 5.56 14.29
閉臂進入次數百分比(%) 53.33 50 47.62 22.22 44.44 33.33
M1~M3小鼠首先經過跳臺實驗才進行高架十字迷宮,而M4~M6首先進行了高架十字迷宮,而且,M4、M5在進行實驗前受到了強烈的電刺激,M6未受到任何刺激即進行高架十字迷宮實驗。
由表1可知,M1~M3在經過跳臺實驗的5min訓練與5min記憶測試后,進行高架十字迷宮結果顯示3只小鼠均未曾進入開臂區域,開臂進入次數百分比與開臂滯留時間百分比均為0,表現出極高的焦慮狀態(宗紹波等20xx)。而M4、M5在受到強烈電刺激后,開臂進入次數百分比(%)M4(27.78)大于M6(14.29),而M5(5.56)小于M6(14.29);開臂滯留時間百分比(%)M4(20)大于M6(18.33),而M5(0.09)小于M6(18.33)。M4與M5在面對強烈電擊刺激后,表現出不同的結果,M4相對M6緩解了焦慮情緒,而M5相對M6焦慮狀態加深,但是依舊比M1~M3更不焦慮。
故認為,強烈的電刺激對小鼠的焦慮狀態的影響有個體差異,有的小鼠會因此而焦慮,有的小鼠則感到放松,而M1~M3在跳臺實驗中長時間受到輕微電刺激,焦慮狀態嚴重,小鼠的恐懼顯著強于探索的沖動。但是M4與M6的測試結果雖然顯示M4沒有M6焦慮,數據卻并不具有顯著的差異,故可能是個體差異,需要進行多次重復實驗才能確定強烈電刺激對緩解焦慮是否有效,可能進行多次重復實驗后可以發現,M6焦慮程度屬于個體因素,強烈電刺激會讓小鼠產生焦慮,只是焦慮的強度有所浮動。
M1~M6的實驗過程均設定為300s,但是最終導出數據顯示M1~M5測試時長均為220s,僅M6測試時間符合設定為300s.但是M1~M6測試錄像導出后均為300s時長,因此可能是軟件分析功能出現了一些問題。
高架十字迷宮實驗在進行中還要注意一些步驟,比如,實驗開始時,實驗者需手持小鼠使其背對實驗者放置在開臂和閉臂的結合處,使小鼠從中央格面面向閉合臂,且實驗中所有小鼠均需面對同一開臂,否則可能會產生數據偏差(王維剛等20xx)。如果在實驗中小鼠從高架十字迷宮上掉落,需要立即從地上抓起放回迷宮并記錄該意外事件,在數據處理時分析影響。
六、參考文獻
王維剛,吳文婷,周嘉斌,嚴惠敏(20xx).小鼠動物實驗方法系列專題(五) 應用高架十字迷宮
分析小鼠焦慮行為. 中國細胞生物學學報, (05): 466-472
宗紹波,魏盛,蘇云祥,張惠云,喬明琦(20xx).焦慮大鼠模型高架十字迷宮實驗的復測信度檢
驗及參數相關性分析. 中國醫藥導報, (30): 5-7
生物實驗報告15
一、實驗目的
1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發生滲透作用的原理。
二、實驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的'濃度時,細胞液中的水分會通過原生質層進入外界溶液,導致細胞壁和原生質層收縮。由于原生質層的收縮性較大,隨著細胞不斷失水,原生質層逐漸與細胞壁分離,形成質壁分離。當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,外界溶液中的水分透過原生質層進入細胞液,使原生質層逐漸恢復原狀,植物細胞逐漸發生質壁分離的復原過程。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實驗過程(見書p60)
物理實驗報告 ·化學實驗報告 ·生物實驗報告 ·實驗報告格式 ·實驗報告模板
五、討論
1. 如果把洋蔥表皮細胞浸泡在與細胞液等滲的蔗糖溶液中,這些細胞會發生質壁分離現象。
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發生質壁分離現象?為什么?
3.繪制一組模式圖,描述一個細胞在正常狀態下,經過處理后的變化。首先將細胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理,然后再經過清水處理。
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